HaCat 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品編號(hào)：KMCC-001-0256

細(xì)胞名稱：HaCat 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞

英文名稱：Human Immortalized Epidermal Cells

別稱：HaCaT，HACAT，人永生化表皮細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

組織來(lái)源：皮膚

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)基：89% DMEM培養(yǎng)基 + 10% FBS + 1% 雙抗

生長(zhǎng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:4，每周 2~3次

凍存條件：采用細(xì)胞凍存液，梯度降溫，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞用途：僅供研究之用

該細(xì)胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白陽(yáng)性。

產(chǎn)品編號(hào)：KMCC-001-1384

細(xì)胞名稱：HPT-8 人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞

英文名稱：Human Feeder Epithelial Cells

別稱：HPT8，人滋養(yǎng)層上皮細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

組織來(lái)源：表皮

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)基：89% RPMI-1640 培養(yǎng)基 + 10% FBS + 1%雙抗

生長(zhǎng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細(xì)胞凍存液：80%培養(yǎng)基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降溫，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞用途：僅供研究之用

細(xì)胞名稱：ES-E14TG2a 小鼠胚胎干細(xì)胞

英文名稱：Mouse Embryonic Stem Cells

別稱：ESE14TG2a

種屬來(lái)源：小鼠

組織來(lái)源：胚胎

細(xì)胞形態(tài)：球形克隆細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)基：DMEM 培養(yǎng)基 + 15% ES級(jí) FBS + 1% L-Glu + 1% NEAA + 1% 丙酮酸鈉 + 1uL/mL beta- Mer + 0.1uL/mL LIF + 1% 雙抗

生長(zhǎng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細(xì)胞凍存液，梯度降溫，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞用途：僅供研究之用

細(xì)胞培養(yǎng)操作

1. 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

1.1 在超凈臺(tái)中取配好的*培養(yǎng)液5ml到15ml離心管中放至室溫備用。

1.2 快速將干冰或液氮保存的細(xì)胞株，放入37℃的水浴鍋后不停晃動(dòng)凍存管，使其解凍并達(dá)到37℃，此過(guò)程盡量保持在3分鐘內(nèi)完成。（備注：此處注意，管身或管內(nèi)的液氮揮發(fā)完后才可放入，否則有炸裂風(fēng)險(xiǎn)）

1.3 將化凍的細(xì)胞液快速轉(zhuǎn)移至上述準(zhǔn)備好培養(yǎng)基中，1000rpm 、4min離心收集細(xì)胞并傳代，傳代方法如下：

2. 細(xì)胞傳代處理

2.1 待長(zhǎng)滿瓶底至80%以上時(shí)，貼壁細(xì)胞棄掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用1X PBS洗兩遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，直至看到有細(xì)胞從瓶底上脫落分離。

2.3 加入2mL*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打?qū)⑺屑?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落并轉(zhuǎn)移到離心管中，1000rpm 、4min離心收集細(xì)胞。

2.4 收集好的細(xì)胞用*培養(yǎng)基重懸，并輕輕吹打懸浮，若無(wú)特別說(shuō)明，就按1:2~1:3的比例鋪新的培養(yǎng)瓶，放進(jìn)培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)（每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)條件不同，大部分細(xì)胞5%CO2、37℃恒溫培養(yǎng)）。

3.細(xì)胞凍存處理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的細(xì)胞用細(xì)胞凍存液（若無(wú)特殊說(shuō)明，一般細(xì)胞凍存液成分為：10%血清+80%培養(yǎng)基+10%DMSO）懸浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃過(guò)夜，液氮長(zhǎng)期的溫度梯度進(jìn)行保存。

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