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耐藥細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些?

更新時(shí)間:2022-10-22點(diǎn)擊次數(shù):1204
  耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性,從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些?
  
  1、在體外,低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。
  
  2、藥物對親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法,計(jì)算耐藥指數(shù)。
  
  目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中,常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。
 
  

耐藥細(xì)胞株
 

 

  1、增加藥物濃度的方法是指用低濃度藥物刺激細(xì)胞,待細(xì)胞適應(yīng)低濃度環(huán)境后,再稍微增加藥物濃度,繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)當(dāng)前環(huán)境。經(jīng)過反復(fù)培養(yǎng)和加壓,細(xì)胞終于可以在高濃度藥物環(huán)境中存活。
  
  2、大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入超高藥物濃度的藥物,但孵育時(shí)間很短,通常只有幾分鐘。然后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無藥物培養(yǎng)液中緩慢恢復(fù)。最后,通過重復(fù)上述步驟,篩選出高倍數(shù)耐藥細(xì)胞系。
  
  兩種方法各有利弊:增加藥物濃度法的優(yōu)點(diǎn)是耐藥細(xì)胞株的藥物劑量是漸進(jìn)的,細(xì)胞培養(yǎng)的外部環(huán)境是逐漸改變的,細(xì)胞更耐受,處于更好的狀態(tài),但缺點(diǎn)是耐藥誘導(dǎo)的過程需要較長時(shí)間,其化療藥物的作用方式與大劑量、短療程化療的臨床原則不同;大劑量藥物沖擊誘導(dǎo)的優(yōu)點(diǎn)是接近臨床治療大劑量化療藥物沖擊,缺點(diǎn)是大劑量藥物沖擊誘導(dǎo)的藥物濃度很高。由于外界環(huán)境突變,細(xì)胞培養(yǎng)可能難以耐受,細(xì)胞狀態(tài)難以控制,耐藥性不穩(wěn)定。
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